|
|
Porovnání přístrojového a mikroskopického stanovení diferenciálního rozpočtu leukocytů
NETREFOVÁ, Veronika
V této práci se zabývám metodami stanovení diferenciálního rozpočtu leukocytů a jejich klady a zápory. Není divu, že v dnešní době se spolu s rozvojem vědy a techniky, využívají ke stanovení diferenciálního rozpočtu leukocytů moderní hematologické analyzátory, ovšem manuální stanovení pomocí mikroskopu zůstává i nadále základem dobré práce v hematologické laboratoři. V praktické části popíši jednotlivé pracovní postupy a podle zjištěných výsledků pak tyto metody porovnám. Pro automatické stanovení diferenciálního rozpočtu leukocytů se v Nemocnici České Budějovice a.s. využívá analyzátor Coulter LH 750 společnosti Beckman Coulter, založený na principu elektrické impedance. V případě mikroskopického stanovení vytvoříme krevní nátěr, který obarvíme metodou dle Pappenheima s použitím barviv Maye - Grünwaldova a Giemsa - Romanovskeho. Dále se pokusím navrhnout optimalizaci pro stávající postup vyšetření kompletního krevního obrazu.
|
|
|
Cirkadiánní změny hemocytů Spodoptera littoralis
TREFILOVÁ, Terezie
ABSTRAKT: Naše práce studovala morfologii hemocytů a stabilitu základních nepatologických hematologických hodnot v průběhu 24 hodin, jako biomodel byla použita Spodoptera littoralis. (Boisd.) (Lepidoptera: Noctuidae) v šestém instaru. K pozorování hemocytů jsme vybrali světelnou mikroskopii. Před vlastním pozorováním jsme z odebrané hemolymfy zhotovili preparát, který jsme obarvili pomocí Pappenheimova barvení. Tato metoda barvení se běžně používá ve veterinární i v humánní laboratorní praxi v hematologii. Pozorovali jsme 6 druhů hemocytů a to: malé granulocyty (mGR), velké granulocyty (vGR), malé prohemocyty (mPR), velké prohemocyty (vPR), sférulocyty (SF) a plazmatocyty (PL). Pappenheimovo barvení nám též umožnilo pozorovat apoptózu. Znalost cirkadiánních změn hemocytů u S. littoralis, je velice důležitý fakt, pakliže bychom chtěli využívat tohoto živočicha jako nový biomodel například pro výzkum v oblasti imunologie, hematotoxikologie nebo farmakotoxikologie. Změny v hladinách některých látek mohou být fyziologické a to, i když jsou mimo hranici referenčních hodnot (Knapp et al., 1984). Zjistili jsme, že počet jednotlivých hemocytů v průběhu dne není stálý. O půlnoci pozorujeme nejnižší počet mPR i vPR a naopak nejvyšší počet apoptotických buněk a vGR. Pro zpřesnění a zrychlení odečtu koncentrace, jsme zkusili využít přístroje ELISA reader (Sunrise, Tecan) založený na fotometrickém měření. Vzhledem k velkým rozsahům naměřené koncentace (cca. od 2-30 mmol/l) posuzujeme využití ELISA readeru jako nevhodné.
|
|
|
Morfocytometrické vyšetření haemocytů ve srovnávací hematologii
ŠUBJAK, David
Standardní hematologické postupy v preklinických studiích toxicity jsou většinou prováděné na savcích, velmi často se jako hematotoxikologické modely používají bezobratlí,protože mohou být využiti při screeningu myelotoxicity. V této práci jsme zkoumali haemocyty Culex pipiens jako nový potenciální alternativní hematologický biomodel in vivo. Preparáty pro mikroskopickou analýzu přichystané z hemolymfy byly obarvené Pappenheimovo metodou pro zvýraznění morfologie a toluidinovou modří a AgNOR pro zvýraznění jadérek. Mikroskopické snímky byly zpracovány obrazovou analýzou,kde byla vyhodnocena velikost buňky, jádra a jadérka. Bylo nalezeno šest druhů haemocytů: granulocyty, prohemocyty, spherulocyty, plasmatocyty, adipohemocyty a oenocyty. Díky obrazové analýze jsme vytvořili morfometrický profil každého typu haemocytů a stanovili jsme jaderný koeficient. Popsali jsme významné rozdíly mezi velikostí prohemocytů, plasmocytů a oenocytů. Na základě velikosti jadérek jsme rozdělili haemocyty na další dvě významné skupiny. Obrazová analýza se zdá býti velmi nápomocnou při rozlišení různých haemocytárních linií, ale nemůžeme ji obecně použít pro rozlišení bez osobní kontroly díky přítomnosti statistických rozdílů nalezených pouze u některých srovnání buněčných typů.
|
|
|
Vyšetření změn fagocytózy pro screening hemotoxicity na modelovém objektu
JURČOVÁ, Martina
Tato práce se zabývala studiem laboratorních metod vyšetření fagocytózy a byl proveden výzkum, který testoval změny fagocytózy na modelovém živočichu S. littoralis. Výsledky príce prokázaly předpokládané zvýšení fagocytózy aplikací modelové látky. Námi použité testy poměrně dobře prokázaly změny fagocytární aktivity a produkce cytotoxických látek a modelový živočich byl hodnocen jako vhodný k dalších studiím hemotoxicity.
|
host ::
RSS.